關于程序降溫盒的使用經驗分享

　　
　　
　　程序降溫盒是細胞凍存盒類產品的經典實驗耗材之一。該程序降溫盒或稱細胞凍存盒為成功冷凍保存細胞提供和良好重復性的冷卻率：-1℃/分的冷凍率。
　　
　　程序降溫盒的使用注意事項如下：
　　
　　經驗1：凍存盒外表面有刻度的吧，異丙醇液面要高于底線。4a.C*D8Y&P9A,y
　　
　　凍存盒肯定是先放在室溫，然后放進去細胞，置于-80，利用異丙醇實現梯度降溫啊。)
　　
　　根據論壇里的討論，異丙醇使用過一段時間后是要更換的，但是我一直沒換過，也沒發現很大問題。
　　
　　經驗2：我們實驗室凍存盒平時放4度，需要凍細胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉移至液氮，貴重的細胞盡快轉移，不然會影響復蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-80的，很方便，效果也不錯的。
　　
　　經驗3：異丙醇的量是要保證的，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用，我們是在4度放置，放了細胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉移到液氮，效果很不錯。異丙醇熔點：-87.9度的色透明具有乙醇氣味的可燃性有毒液體。注意了有可燃性!急性毒性：口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤。刺激數據：眼睛-兔子100毫克/!請注意清理!
　　
　　經驗4：應該不可以把凍存盒放4°的，因為梯度降溫的起始點是室溫20°左右，所以從-80℃拿出來的凍存盒應該現在室溫靜置一段時間待其恢復到室溫再使用。而其中的異丙醇應使用6~7此后更換一次，而且保證液體量達到刻度線，否則降溫效果會受到影響。
　　
　　經驗5：凍存盒里的異丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理論上是5次以后更換異丙醇，但是異丙醇對環境有害，我們可以多用幾次，只是少了的時候要加滿。還有凍存液里面的DMSO對細胞有毒性，尤其是室溫的時候，所以凍存盒和凍存液先放4°，等把細胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里，還放回4°，等到出細胞間的時候再拿到-80°里面保存。過夜再轉入液氮。